Porte-clés neurones hippocampaux 3

Répartition des neurones hippocampaux exprimant EGFP du promoteur Nr4a1/Nur77 (Tg(Nr4a1-EGFP)GY139Gsat, www.gensat.org) en hippocampal CA1 colablée pour le transporteur de glutamate vésiculeux (VGluT1, rouge, Invitrogen polyclonal, 1:100000 0) et taché avec DAPI (bleu) pour afficher les calques de cellules. L'expression EGFP a été amplifiée avec l'anti-GFP de poulet (Abcam, 1:2000). VGluT1 terminaisons excitatrices étiquettes qui se synapsent dans la couche moléculaire du gyrus denté, des terminaisons de fibres de mousse dans CA3 et des champs dendritiques des cellules pyramidales dans l'orien de strate et le radiatum de strate. Nr4a1-EGFP est fortement exprimé par les cellules pyramidales CA1 et, dans une moindre mesure, dans les cellules pyramidales CA3 avec des cellules clairsemées dans le gyrus denté (voir images associées). La section (40 um, sagittal) a été montée avec le Fluoromount G et a été imaginée avec un objectif de 5X, 0,15 NA sur un microscope Zeiss Axiovert. AF568 a été excité à 562/40 nm et les émissions recueillies à 624/40 nm avec des filtres Semrock et un dichroïque à une seule bande (530-585 nm réfléchi, 601-800 nm transmis). AF488 a été excité à 482/35 nm et les émissions recueillies à 536/40 nm avec des filtres Semrock et un dichroïque à une seule bande (réfléchi à 446-499 nm, transmis à 513-735 nm). Le DAPI a été excité à 350/50 nm et les émissions recueillies à 460/50 nm avec un CLP400 dichroïque (Chroma). Des images uniques ont été capturées pour chaque canal à l'aide d'un CCD Zeiss Axiocam MR et pseudo-coloré à l'aide d'Axiovision. La soustraction des arrière - plans linéaires a été utilisée sur l'image présentée. Voir Davis et Puhl (2011), Pubmed ID 21305052, pour un protocole de coloration détaillé et des images de l'expression EGFP dans le striatum et l'amygdale dans cette souche. Cette image fait partie d'une série qui caractérise l'expression EGFP du promoteur Nr4a1 dans tout le cerveau.